Типични компоненти на aфлуоресцентен микроскопса:
Флуоресцентни багрила (флуорофори)
Флуорофорът е флуоресцентно съединение, което отново излъчва светлина, когато е възбудено от светлина.
Флуорофорите обикновено съдържат няколко свързани ароматни групи или са равнинни или циклични молекули с няколко π връзки.
Много флуоресцентни багрила са проектирани за много биомолекули.
Някои от тях са малки молекули, които по своята същност са флуоресцентни и свързват интересуващата ни биомолекула. Основни примери за тях са оцветяването на нуклеинова киселина като DAPI и Hoechst, фалоидин, които се използват за оцветяване на актинови влакна в клетки на бозайници.
източник на светлина
Използват се четири основни вида светлинни източници, включително ксенонови дъгови лампи или живачни лампи с възбуждащи филтри, лазери и светодиоди с висока мощност.
Лазерите се използват главно в сложни техники за флуоресцентна микроскопия, докато ксенонови лампи, живачни лампи и светодиоди с дихроични възбуждащи филтри обикновено се използват в широкополова флуоресцентна микроскопия.
Филтър за възбуждане
Възбудителят обикновено е лентов филтър, който пропуска само дължини на вълните, абсорбирани от флуорофора, като по този начин минимизира възбуждането от други флуоресцентни източници и блокира възбуждащата светлина в лентата на флуоресцентно излъчване.
дикротично огледало
Дихроичният филтър или тънкослойният филтър е много прецизен цветен филтър, използван за селективно отразяване на светлината в малък диапазон от цветове, като същевременно отразява други цветове.
Емисионен филтър.
Емитерът обикновено е лентов филтър, който пропуска само дължината на вълната, излъчвана от флуорофора, и блокира цялата нежелана светлина извън тази лента, особено възбуждащата светлина.
Филтрите осигуряват минимален фон чрез филтриране на нежелана енергия на възбуждане (включително UV и IR) или автофлуоресценция на проба и система.
