Стерилизацияе крайъгълен камък на клетъчната биология и биомедицинските експерименти. Повечето биомедицински лаборатории не биха могли да извършват никаква работа, включваща култивиране на живи клетки без стерилизирани лабораторни инструменти. Докато много лаборатории се радват на неофициална връзка със стерилността, изключително рядко е да се подценява въздействието на наличието на стерилни лабораторни инструменти. Независимо от това, стерилизацията често се свежда до важна работа за началния лабораторен персонал, подобно на почистването на стъклени съдове.
Слабият процес на стерилизация на инструменти може да доведе до по-големи финансови загуби, отколкото пълната липса на съоръжения за стерилизация. Когато лабораториите използват лошо стерилизирано оборудване, експериментите могат лесно да се замърсят, което води до загуби поради неизползваеми или необичайни резултати. В някои случаи замърсеното оборудване може да замърси други инструменти или хардуер, причинявайки множество експериментални грешки в лабораторията, които могат да бъдат трудни за изолиране и отстраняване. Избягването на тези клопки на неадекватната стерилизация изисква строг и ориентиран към резултатите подход за спазване на стерилността - практика, която много лаборатории биха могли да извлекат полза от приемането.
Кои инструменти трябва да бъдат стерилизирани?
Стерилизацията е изключително важна за всяка лаборатория, която извършва работа с клетъчни култури, дотолкова, че не е преувеличено да се каже, че всички лабораторни инструменти, включени в клетъчните култури, трябва да бъдат стерилизирани. Повечето лаборатории имат много хардуер и дори да правят клетъчни култури, те не са пряко включени в работата по клетъчните култури. Важно е, че дори оборудване, което не участва в клетъчната култура, може да се възползва от стерилизацията - ако приемем, че лабораторията може да си позволи разходите за стерилизация.
Например, лаборатории, които рутинно извършват генетично секвениране или PCR, може да сметнат за трудно икономическо предложение да стерилизират пипетите и термоциклерите, необходими за извършване на работа по молекулярна биология. Тъй като тези устройства не участват в клетъчната култура, последствията от това, че не са напълно стерилни, са минимални - или поне така е обосновката. Най-важното е, че тази обосновка е неправилна.
Въпреки че е вярно, че биологичното замърсяване на тези инструменти няма да доведе до смъртта на много скъпи експерименти с клетъчни култури след излагане на грешни микроорганизми, дори експериментите ex vivo могат да имат своите резултати, повредени от неправилно излагане на биологични материали.
Стерилизирането е важна предпазна мярка дори за лабораторен хардуер, който никога не е бил директно изложен на биологичен материал. Например, като дезинфекцира вътрешността на шкаф за биобезопасност, една лаборатория може да гарантира, че работното пространство за нейните експерименти няма да се превърне в източник на замърсяване. По същия начин стерилизиращата стъклена посуда гарантира, че може да се използва в близост до чувствителни експерименти, без страх от разваляне на резултатите.
Въпреки това, не всички лаборатории разполагат със средства, за да стерилизират всичко, което може да е от полза. Стерилизацията често е скъпа, така че повечето лаборатории в крайна сметка дават приоритет на стерилизацията на критично оборудване, като същевременно позволяват на други инструменти далеч от зоната за клетъчни култури да останат нестерилизирани. Следователно каталогизирането на ресурсите за стерилизация е добър навик за лабораторните работници, тъй като хардуерът, който не може да се използва без стерилизация, е от малка полза, ако повечето друго оборудване в лабораторията не се стерилизира последователно.
От какво се нуждаят лабораториите по време на стерилизация на инструменти
Процесът на стерилизация има няколко различни етапа, всеки от които изисква различно пространство в лабораторията. Пространствената сложност на процеса на стерилизация зависи от това дали лабораторията провежда изследвания, клинична работа или производство. Производството и клиничната работа имат по-високи стандарти за стерилност от изследователската работа, така че разделянето и сложността на пространствата за стерилизация са по-очевидни. Накратко, трите пространства, необходими за процеса на стерилизация, са:
зона за обеззаразяване
площ за опаковане
Зона за стерилизация
Всяко пространство има различно предназначение, съответстващо на етапа на процеса на стерилизация, за който е отговорно. Зоната за обеззаразяване е мястото, където се установява основата на стерилността, като се премахват възможно най-много замърсители чрез използване на груби методи като почистване с нестерилна вода или почистващи химикали.
Тъй като дезактивацията често е объркана работа, повечето лаборатории предпочитат да имат място за дезактивация извън основното работно пространство на лабораторията. Целта на обеззаразяването е да се отстранят всички видими замърсявания от инструмента или оборудването, което се стерилизира. Това може да включва всичко - от бучки мръсотия до натрупващи се почистващи химикали. Важно е процесът на обеззаразяване да не оставя нищо, което не е присъствало преди началото на процеса. Поради това повечето процеси на обеззаразяване завършват с почистване на оборудването с вода.
След дезактивация лабораторията трябва да опакова оборудването, което ще се дезактивира, така че функционалните повърхности на хардуера да могат да бъдат изложени на стерилизатора, но не и на външен въздух или друга среда, която може да доведе до ново замърсяване.
Например, за да използвате гореща пара, за да стерилизирате вътрешността на цев в автоклав, трябва да „опаковате“ цевта, като поставите парче станиол хлабаво върху отвора на цевта и го залепите отстрани. Така че при автоклавиране Когато горещата пара в стерилизатора стерилизира кофата, парата може да тече под фолиото, стерилизирайки функционалната повърхност на кофата (вътрешността, която задържа течността), и след това изтича навън. Тъй като фолиото е залепено към цевта, функционалната повърхност на цевта ще остане защитена от елементите и стерилна дори след като цевта бъде извадена от автоклава. Въпреки това, за лаборатории, които работят с клинични материали или произвеждат фармацевтични продукти, стандартът за стерилни опаковки далеч надхвърля обикновеното решение за кофи от станиол.
Зоната за стерилизация е сърцето на процеса на стерилизация. В зависимост от подхода на лабораторията, зоната за стерилизация може да използва един от няколко различни метода за стерилизация. Тези методи могат да включват гореща пара и налягане, като например в стандартен лабораторен автоклав, или по-екзотични методи, като облъчване с гама лъчи. Повечето лаборатории се придържат към какъвто и да е метод за стерилизация, наличен в тяхното съоръжение, което означава използване на автоклав през по-голямата част от времето. Въпреки това, за лабораториите, участващи в производството на фармацевтични продукти или медицински изделия, облъчването е по-често срещано.
Валидиране на процеса на стерилизация
След приключване на цикъла на стерилизация повечето лаборатории разполагат с един от няколко метода, за да проверят дали оборудването им е наистина напълно стерилизирано, а не само частично стерилизирано. Най-лесният начин да проверите това е със скромната автоклавна лента. Въпреки че е подходяща само за проверка на стерилизацията в контекста на автоклав, лентата за автоклав е ефективна, защото се променя, когато е изложена на условия на стерилизация за времето, необходимо за гарантиране на пълен цвят на стерилизация. Поради това много лаборатории използват масово автоклавна лента по време на процеса на стерилизация.
По-сложното валидиране на стерилизация изисква експерименти с клетъчни култури. В типичен експеримент за проверка на стерилизация, проба от жизнеспособна бактериална култура преминава през процес на стерилизация, използван в лабораторията, и след това контейнерът на културата се промива, за да се получат жизнеспособни клетки. След това тампоните се култивират в продължение на няколко дни и се наблюдават нови клетъчни колонии. Ако не растат колонии, процесът на стерилизация е успешен.
Направете тръбопроводите за стерилизация да постигат резултати
Преди лабораториите да могат успешно да стерилизират свързания хардуер за клетъчни култури, те трябва да разполагат с подходящите консумативи. Проследяването на големия обем реактиви, почистващи препарати и материали за еднократна употреба, необходими за процеса на стерилизация, може да бъде трудно, особено за лаборатории без дълга история на асептична техника или стерилно производство. За всичко - от автоклавна лента до решения за почистване на етапа на обеззаразяване, работата с опитен доставчик е основен фактор в подкрепа на успешната стерилизация и експериментиране.
